Nereus LentiHERO? | 一種提高慢病毒回收率與純化效率的新技術(shù)


病毒載體技術(shù)的研究不斷深入和發(fā)展,為遺傳物質(zhì)遞送提供了理想的工具,成為目前
細胞治療與基因治療的主要遞送技術(shù)。然而,研究人員在細胞基因治療產(chǎn)品的純化工藝方面卻面臨著(zhù)重大挑戰。目前的純化工藝大都來(lái)源于為單克隆抗體開(kāi)發(fā)的解決方案,不適合用于病毒載體的純化。而基于傳統樹(shù)脂色譜法有明顯的局限性,如回收率低、耗時(shí)且成本高。

AstreAdept? 是一種新型的納米纖維材料,可有效解決粒徑大且脆弱的病毒顆粒純化面臨的耗時(shí)長(cháng)、回收率低且雜質(zhì)含量高等問(wèn)題。在這里,我們展示了該技術(shù)整合到離心管形式的Nereus LentiHERO?,并將其優(yōu)勢帶到實(shí)驗室規模的病毒載體純化中。

 

高瞬時(shí)結合表面積,更高效地處理慢病毒載體
AstreAdept?采用兩種不同的電紡材料(纖維素:575nm(+/- 50 nm)和非纖維素:200nm(+/- 50 nm))交織形成特性優(yōu)越的復合膜結構,可使產(chǎn)物溶液在高流速條件下快速擴散到高結合表面積(圖1,實(shí)現無(wú)阻礙的進(jìn)入孔道。將該技術(shù)整合到層析純化基質(zhì)的LentiHEROTM將慢病毒純化帶入一個(gè)新的紀元。

1.  AstreAdept? 新型的復合納米纖維材料解決脆弱大分子純化的瓶頸問(wèn)題。

 

無(wú)阻礙液體流動(dòng)系統優(yōu)點(diǎn):


  • 結合表面積更大
  • 高回收率
  • 高流速


 

Nereus LentiHERO? 用于慢病毒純化

2. Nereus LentiHERO? 僅需5步離心即可實(shí)現慢病毒快速純化

 

 

Nereus LentiHERO?顯著(zhù)提高慢病毒回收率

高動(dòng)態(tài)結合載量與高回收率,提升實(shí)驗室規模慢病毒生產(chǎn)效率。

3. 15%穿透時(shí),每根離心柱的動(dòng)態(tài)結合載量1.9E+10。 Nereus LentiHERO?離心柱20 mv/min的速度上樣,流穿收集在10mL液體中,使用p24 ELISA分析,基于上樣的總VP,計算VP穿透百分比。

 

4. 有無(wú)血清培養體系慢病毒回收率:純化后樣品中慢病毒/病毒原液%。

血清(-) n=3,血清(+)n=2

 

? 高流速條件下不影響動(dòng)態(tài)結合載量

? 保留時(shí)間 < 1s

? 無(wú)血清培養體系LV回收率>60%

 

Nereus LentiHEROTM宿主細胞蛋白殘留降低95%以上
降低HCP殘留在實(shí)驗室規模的樣品生產(chǎn)同樣重要,可顯著(zhù)減少非必要的免疫反應。

Nereus LentiHERO?純化的樣品

? 95% 宿主蛋白的去除

? 通過(guò)SDS-PAGE,洗脫液中檢測不到宿主蛋白

? 不論培養體系中有無(wú)血清,都能顯著(zhù)去除宿主蛋白

5. Nereus LentiHEROTM可去除95% 以上宿主蛋白

 

Nereus LentiHEROTM對病毒結構和感染效力影響很小

Nereus LentiHERO? 純化后的慢病毒顆粒保持了原有的功能、形態(tài)和大小

? 重要結構蛋白完整,如編碼了衣殼、基質(zhì)與核衣殼的Gag蛋白

? 慢病毒顆粒大小和形態(tài)無(wú)改變

? 純化后的慢病毒感染活力未降低

6. 通過(guò)WB、電鏡和細胞感染實(shí)驗分別對比Nereus LentiHERO? 純化后慢病毒結構蛋白的完整性、顆粒形狀大小與感染活力均未受到顯著(zhù)影響。

 

Nereus LentiHEROTM兼具了產(chǎn)量、純度和時(shí)間效益

? 一臺臺式離心機即可實(shí)現高通量病毒純化

? 宿主細胞蛋白去除的同時(shí)樣品洗脫體積減?。饪s)

? 高純度、小體積樣品的進(jìn)一步濃縮更節省時(shí)間

 

 

Nereus LentiHERO? 性能總結

? 一種新型基于納米纖維膜的AstreAdept? 技術(shù)為病毒載體純化工藝賦能

? 易于操作的設計,實(shí)現了功能性慢病毒顆粒的快速純化和高回收率

? 能顯著(zhù)降低如宿主細胞蛋白(HCP)等雜質(zhì)的含量

? 可以同時(shí)處理多個(gè)樣品, 突破病毒載體開(kāi)發(fā)樣品制備的瓶頸

 

7. LV 純化高得率,高通量,高純度,適用于小體積慢病毒樣本,操作時(shí)間短。

 

綜上所述,該技術(shù)提供了一種更具成本效益和時(shí)間效率的方案,提高研究人員對新型細胞和基因治療項目的開(kāi)發(fā),助推新型生物治療藥物惠及廣大患者。

 

產(chǎn)品信息*

品名

貨號

規格

Nereus LentiHEROTM

NL100100

2 unit pack

*采用相同技術(shù)適用于工藝放大LentiHERO® 1LentiHERO® 10預裝柱產(chǎn)品已上市,歡迎咨詢(xún)Astrea Bioseparations代理商北京西美杰科技有限公司。

 

Astrea Bioseparations1987年孵化自劍橋大學(xué),擁有超過(guò)30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗,是世界級層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)供應商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過(guò)21個(gè)生產(chǎn)工藝通過(guò)了FDAEMA的批準。Astrea在希臘語(yǔ)中是星際少女的意思,象征著(zhù)正義、純真、純潔和精確。使用Astrea Bioseparations這個(gè)名字體現了我們在工作中對純潔、精確和人性一如既往的關(guān)注。Astrea Bioseparations在全球擁有3個(gè)研發(fā)和生產(chǎn)基地,專(zhuān)注為生物大分子和CGT領(lǐng)域提供行業(yè)領(lǐng)先的層析介質(zhì)和技術(shù)服務(wù)。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術(shù),解決了傳統生物分離工載量和工藝耗時(shí)問(wèn)題,實(shí)現更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過(guò)程,完全符合當今生物治療創(chuàng )新的需求。

 

 

北京西美杰科技有限公司Astrea Bioseparations品牌在中國的一級代理商,如您對上述產(chǎn)品感興趣,歡迎隨時(shí)撥打西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄西美杰官網(wǎng)www.mm2332.com查詢(xún)訂購。

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